1、从第一代 ADC 到第二、三代 ADC 药物，抗体经历了鼠源单抗、人鼠嵌合单抗到人源化抗体的转变，在第二、三代 ADC 药物中，人源化抗体已被广泛使用。在已上市的ADC 药物中，靶向 CD22 的 Lumoxiti 采用鼠源 IgG1 抗体，靶向 CD30 的 Adcetris 采用人鼠嵌合单抗，其余 ADC 产品均使用人源单抗。大批使用鼠源单抗/人鼠嵌合单抗的 ADC药物倒在临床试验，根源在于这类抗体可被人体免疫系统识别，当作异源抗体被快速清除。辉瑞的 ADC 产品普遍采用 IgG4 抗体，例如 Mylotarg 和 Besponsa 均使用 IgG4 抗体。但其他公司则更青睐 IgG1 抗

2、体，这是由于 IgG4 不具备 ADCC、CDC、ADCP 作用且在低 PH 条件下容易聚集，而 IgG1 抗体不但 ADCC 和 CDC 活性较强，且 拥有较高的稳定性。但是，ADCC 和 CDC 作用对于 ADC 药物发挥药效的帮助究竟几何，仍难下定论，毕竟，ADC 药物主要依靠细胞毒药物发挥杀伤作用 且须快速内吞 。与这一机制类似的为免疫检查点抑制剂，由于免疫检查点抑制剂不依赖 ADCC 和 CDC 作用，且为了规避 IgG1亚型在特殊情况下诱发细胞因子风暴的潜在风险， 因此普遍采用 IgG4 亚型，如 O 药、K药、卡瑞利珠单抗。此外，尽管 T 药采用了 IgG1 亚型，但去除了糖基化

3、，不发挥 ADCC的作用。新一代 ADC 药物往往采用亲和力更强的单抗。随着抗体亲和力的提升，抗体与低表达靶点的结合能力更强，所须的药物剂量相对更低，产生的不良反应越少。抗体亲和力通常可用 EC50 或 IC50 表示，EC50 和 IC50 的值越小，代表抗体亲和力越高。对于 HER2 ADC 药物，绝大多数 ADC 药物均使用曲妥珠单抗，荣昌生物另辟蹊径，在 RC48 中采用 Disitamab 新型抗体。Disitamab 的亲和力显著高于曲妥珠单抗，与曲妥珠单抗 20.1pM 的 EC50 相比，Disitamab 的 EC50 仅 6.4pM。凭借更强的亲和力， RC48在 HER2

4、 低表达的乳腺癌和胃癌上表现同样优异 。可剪切的 ADC 药物正在成为主流。在酸或溶酶体蛋白酶的作用下， Linker 在靶细胞中被切割释放出小分子毒素，小分子毒素可穿透细胞膜进入相邻肿瘤细胞，发挥旁观者效应(Bystander effect)。但旁观者效应是一把“双刃剑”。当相邻细胞为癌细胞时， Bystander effect 可发挥积极的作用，即实现旁杀伤;但是当相邻细胞为正常细胞时， Bystander effect 则会“误杀”。针对这一问题，Mersana 公司研发了 DolaLock Payload，该 payload 为 Auristatin类衍生物。携带 DolaLock P

5、ayload 的 ADC 药物进入靶细胞后，ADC 在特定条件下裂解， Payload 发挥旁观者效应。但 DolaLock Payload 的 旁观者效应仅可持续一段时间， 随后Payload 代谢为一种依旧高效、但无法跨膜的形式，将 Payload“锁”在原靶细胞中，进而有效控制旁观者效应。随机偶联主要包括赖氨酸随机偶联与半胱氨酸随机偶联，就二者比较，半胱氨酸(-SH)的偶联方式较赖氨酸 (-NH2)的偶联方式异质性更小，附着部位更容易预测。原因在于 IgG 仅含有 4 个链间二硫键，仅可产生 8 个有效负荷供偶联，远远低于抗体上存在的 80-100 个赖氨酸偶联位点。而赖氨酸偶联还会产生

6、大量的裸抗， Mylotarg 裸抗的概率高达 50%，导致其一度沦为昂贵且高副作用 的 “单抗”药物。新一代的 ADC 药物普遍采用定点偶联的连接方式，如新码生物的 ARX788 使用非天然氨基酸定点偶联技术，科伦药业的 A166 采用赖氨酸定点定量偶联技术等。但定点偶联是否真的优于随机偶联，目前仍难下定论，毕竟目前尚无定点偶联的 ADC 产品获批上市，而 Seattle Genetics 的定点偶联产品已全部宣告失败。此外，定点偶联往往产生DAR 在 2-4 区间的 ADC 药物，低 DAR+高毒性 Payload 一度被认为是最优 ADC 药物的设计模式，但这一概念随着 DS-8201(Enhertu)和 Trodelvy 的上市而备受质疑。ADC 药物的疏水性问题可能导致癌细胞上调 MDR1 的表达，产生过量 P-糖蛋白，将 ADC 药物泵出细胞外，减低了细胞内的药物浓度并使细胞产生多重耐药性( MDR)。由于 P-糖蛋白作用的常为疏水性分子，因此可通过改善药物在水中的溶解度削弱 MDR效果。在药物的设计中，可使用聚乙二醇( PEG)连接物调整药物水油分布系数。 Immunomedics 研发的 Trodelvy 便运用了较短的聚乙二醇化单元连接体结构，改善了药物在水中的溶解度，可能有助于对抗 ADC 耐药。