多肽合成方法及其优缺点 原图定位 多肽药物可以通过生物合成法或化学合成法制备。近几十年来,多肽药物合成技术发展迅速,目前多肽药物合成方法可分为生物合成法及化学合成法,生物合成法可分为天然提取法、酶解法、发酵法、基因重组法等,化学合成法分为液相合成法及固相合成法。天然提取法是从生物组织中提取多肽物质。先将组织细胞破碎,再通过超声提取、化学试剂提取等物理化学方法进行提取,这一技术受限于天然原料,产量有限,且仅有天然多肽体系,存在纯化难度较高、在临床运用中可能导致病人产生过敏反应等问题;酶解法利用生物酶将蛋白质降解获得多肽,相对于物理或化学提取方法,酶解法具有反应条件温和、选择性高等优势,但也存在投入大产量低、酶解得到的一系列多肽分离纯化难度大等不足;发酵法是利用微生物代谢发酵生产多肽,发酵法能直接生产的特定多肽药物产品仍然较少,目前在食品、化妆品、饲料等行业应用较多。但发酵法原料易得,生产成本低,产业化优势明显,是基因重组法的基础,与之结合具有更为广泛的应用前景;基因重组法利用基因技术将基因片段转移到原核或真核细胞中进行重组表达,基因重组法表达定向强、生产成本低。不足之处在于开发周期长、提取纯化困难、产率低、基因表达研发难度大。液相合成法发展较早,一般可分为两种:逐步合成及片段缩合。逐步合成通常是从多肽链的 C端逐步添加连接氨基酸直至整个多肽链完成。片段缩合一般先 多肽药物行业深度报告 合成各个所需片段,再将各片段缩合,合成目标多肽。液相合成法优势在于成本低、保护基选择多、合成规模易放大、中间产物可以纯化并获得理化常数,适合短肽的合成;固相合成法中第一个氨基酸的 C端预先固定在不溶性载体树脂上,通过缩合反应将该氨基酸脱保护的 N端与羧基已活化的第二个氨基酸进行连接,重复操作(缩合→洗涤→脱保护→洗涤→下一轮缩合),达到所要合成的肽链长度,逐步连接氨基酸,延长肽链,直到多肽链完成。接着进行切肽、修饰、分离纯化,最终获得目标多肽。